Что Клонирует ДНК?
ДНК, клонирующаяся вЊ также известный как молекулярное клонирование, генное клонирование и рекомбинантная технология ДНК - обращается к процессу создания многократных копий изолированного фрагмента ДНК или фрагментов в пробирке или в естественных условиях методы. Возможно клонировать все генные фрагменты, случайные части фрагментов ДНК или определенных последовательностей ДНК. Кроме клонирования ДНК, два других главных типа клонирования - репродуктивное клонирование, которое касается человека, и клонирование животных, и терапевтическое клонирование, касались эмбриональным клонированием, чтобы собрать стволовые клетки для исследования и потенциальных целей лечения.
есть различные процедуры по клонированию ДНК, но некоторые шаги являются постоянными для всех. Процесс клонирования ДНК начинается с изоляции фрагмента ДНК или фрагментов интереса от хромосомной ДНК, используя ферменты ограничения или химически синтезируемый oligonucleotides. Другие методы для того, чтобы достигнуть этого включают различные процедуры как цепная реакция полимеразы (PCR), гель агарозы electrophoresis и ДНК sonication.
Изолированный фрагмент ДНК теперь должен быть связан с основной последовательностью ДНК, которая способна к мультиплицированию и размножению и он непосредственно и фрагмент ДНК, связанный с ним. Фермент ограничения сокращает Молекулу ДНК самомультиплицирования, и изолированный фрагмент ДНК вставлен в него процедурой лигатуры, соединяя фрагмент с большей частью. Фрагменты ДНК, к которым таким образом искусственно присоединяются, называют рекомбинантной ДНК.
После того, как к этим двум частям присоединяются, плазмида со вставкой ДНК вставлена в хозяина бактериальные или клетки млекопитающих. Альтернативные методы как химический sensitivation клеток, electroporation и biolistics могут также использоваться. Плазмида обычно содержит выбираемые антибиотические маркеры сопротивления и/или цветные маркеры выбора, которые облегчают знать, были ли клетки успешно transfected с плазмидой вставки ДНК. Антибиотические маркеры сопротивления позволяют только клетки, в которых плазмида была transfected, чтобы вырасти, и цветные маркеры выбора обеспечивают видимые марки, которые могут наблюдаться.
transfected клетки культурны, и быстрое увеличение рекомбинантной ДНК имеет место. Получающиеся клоны - генетически идентичные организмы, содержащие рекомбинантную ДНК. Это может быть подтверждено, используя PCR, анализ фрагмента ограничения, или другие методы упорядочивающего ДНК.
Клонирующаяся ДНК полезен в получении понимания генетической косметики организма и как это затрагивает и влияет на жизненные процессы организма. Клонирование ДНК используется в генетическом снятии отпечатков пальцев; в генной инженерии, чтобы создать заводы с лучшей пищевой ценностью, или лучшим сопротивлением болезням и животным с желательными генетическими особенностями; в производстве белка; и в упорядочивании геномов, чтобы расшифровать закодированный белок или последовательности РНК и выражение белка.
В генотерапии клонирование ДНК используется, чтобы развить новые лечения генетическо-связанных беспорядков. Рекомбинантная технология ДНК произвела более чем 100 продуктов для терапии здоровья человека, таких как: инсулин для диабетиков, фактор VIII и фактор IX для гемофилии A и B, и эритропоэтин (EPO) для того, чтобы лечить анемию.
